Коллаген-пептидные добавки могут быть эффективным средством для улучшения гидратации, эластичности и уменьшения морщин на коже человека. Целью данного исследования было проведение двойного слепого рандомизированного плацебо-контролируемого исследования для клинической оценки влияния низкомолекулярного коллагенового пептида (LMWCP) на гидратацию, морщины и эластичность кожи человека с трипептидом (Gly- XY) содержание >15%, включая 3% Gly-Pro-Hyp. Физические лица (н= 64) были рандомизированы для получения либо плацебо, либо 1000 мг LMWCP один раз в день в течение 12 недель. Параметры гидратации кожи, складчатости и эластичности оценивались исходно, а также через 6 и 12 недель. По сравнению с группой плацебо показатели гидратации кожи были значительно выше в группе LMWCP через 6 недель и 12 недель. Через 12 недель в группе LMWCP оценка визуальной оценки и три параметра морщин кожи значительно улучшились по сравнению с группой плацебо. В случае эластичности кожи один параметр из трех значительно улучшился в группе LMWCP по сравнению с исходным уровнем через 12 недель, в то время как, по сравнению с группой плацебо, два параметра из трех в группе LMWCP были выше со значимостью через 12 недель. Что касается безопасности LMWCP, ни у одного из субъектов не было неблагоприятных симптомов, связанных с исследуемым материалом в течение периода исследования.
Эти результаты свидетельствуют о том, что LMWCP можно использовать в качестве функционального пищевого ингредиента для улучшения гидратации, эластичности и уменьшения морщин кожи человека.
1. Введение
Различные факторы способствуют старению кожи человека. Фотостарение кожи вызывается хроническим воздействием солнечного света и является формой внешнего старения, тогда как внутреннее старение возникает в основном из-за снижения биологической функции и действия активных форм кислорода, образующихся в результате клеточного метаболизма. Хотя как внутренние, так и внешние процессы вызывают возрастные изменения кожи, изменения более заметны в фотостареющей коже, о чем свидетельствует сравнение кожи лица, которая подвергалась воздействию солнца, и кожи ягодиц, которая была защищена от солнца. В коже с сильным фотостарением эластические волокна сильно дезорганизованы и обильно откладываются по всей дерме, а в коже с легким фотостарением показана потеря фибрилл в микрофибриллах из дермы, тогда как сеть эластических волокон постепенно фрагментируется при естественном старении. К признакам фотостарения кожи относятся крупные морщины, сухость, потеря эластичности, пигментация. В процессе фотостарения, вызванного солнечным УФ-излучением, кожа может испытывать потерю коллагеновых и эластических волокон, что, наряду со снижением синтеза гиалуроновой кислоты (ГК), в конечном итоге приводит к образованию морщин, сухости и потере эластичности.
В коже коллаген, эластические волокна и ГК являются основными структурными компонентами дермального внеклеточного матрикса (ECM). Коллаген может составлять >70% сухой массы нормальной дермы кожи человека. Дерма состоит из двух морфологически различных слоев: адвентициальной дермы из тонких коллагеновых волокон и ретикулярной дермы из толстых, грубых пучков коллагена. Эластические волокна кожи состоят из внутреннего ядра из сшитого эластина с наружными слоями фибрилл в виде микрофибрилл. Содержание ГК в дерме намного выше, чем в эпидермисе, а папиллярная дерма имеет значительно более высокие уровни ГК, чем ретикулярная дерма.
Профилактические средства для фотостарения кожи необходимы из-за неизбежности воздействия солнечных лучей. Коллаген используется в качестве функциональных пищевых добавок из-за его эффективности для здоровья кожи. Гидролизаты коллагена или коллагеновые пептиды (КП) также привлекают внимание, поскольку в исследованиях in vitro и in vivo исследуются свойства различных КП, включая гидролизаты рыбьего коллагена, полученные из коллагена I типа из кожи рыб. У бесшерстных мышей пероральное введение низкомолекулярного пептида коллагена (LMWCP), который представляет собой гидролизат коллагена рыбного происхождения, способствует восстановлению коллагеновых волокон и нормальных эластичных волокон в коже из деградированного коллагена и аномальных эластичных волокон, вызванных УФ-излучением. Исследование показало, что это лечение приводит к снижению уровней экспрессии коллагеназ (матриксных металлопротеиназ (ММП)-3 и ММП-13) и активности желатиназ (ММП-2 и ММП-9), таким образом, ингибирует распад дермального коллагена и приводит к в значительном уменьшении морщин кожи и трансэпидермальной потери воды (TEWL), а также в повышении эластичности и гидратации кожи. Эти результаты свидетельствуют о том, что LMWCP влияет на регенерацию коллагеновых и эластических волокон, тем самым улучшая здоровье кожи (барьерная функция, морщины, увлажнение и эластичность). LMWCP содержит 15% трипептида, что отличает его от других CP, которые редко содержат трипептиды.
В этом исследовании было проведено клиническое испытание для дальнейшего изучения пользы LMWCP для здоровья кожи человека с ежедневной пероральной дозой 1000 мг LMWCP в течение 12 недель у 64 женщин-добровольцев в возрасте 40–60 лет с диагнозом фотостарение кожи.
2. Материалы и методы
2.1. Подготовка исследуемого материала и определение дозы
Используемый здесь LMWCP (полученный из Newtree, Seongnam, Korea) представлял собой гидролизат коллагена, полученный из кожи сома сутчи (Pangasius hypophthalmus), с содержанием трипептидов >15%, включая 3% Gly-Pro-Hyp. Тестовая бутылка объемом 50 мл содержала 1000 мг LMWCP вместе с носителем. Плацебо имел тот же состав с тем же ароматом и вкусом, что и тестируемый материал, за исключением того, что LMWCP был заменен водой.
Таблица 1. Состав тестов и препаратов плацебо.
| Ингредиенты | Тест | Плацебо | ||
|---|---|---|---|---|
| Содержание (мг) | Содержание (%) | Содержание (мг) | Содержание (%) | |
| Низкомолекулярный коллагеновый пептид | 1000 | 2 | 0 | 0 |
| Витамин C | 100 | 0,2 | 100 | 0,2 |
| Смесь фруктовых концентратов | 3000 | 6,0 | 3000 | 6,0 |
| Смесь вкусов | 200 | 0,4 | 200 | 0,4 |
| Вспомогательные вещества | 1900 г. | 3,8 | 1900 г. | 3,8 |
| подсластитель | 12,5 | 0,025 | 12,5 | 0,025 |
| Вода | 43 787,50 | 87,575 | 44 787,50 | 89,575 |
| Общий | 50 000 | 100 | 50 000 | 100 |
В предыдущем исследовании на животных с использованием безволосых мышей LMWCP оказывал влияние на образование морщин, увлажнение кожи, ТЭПВ, эластичность кожи, образование коллагена в дерме и регуляцию экспрессии ММП-3 и ММП-13, а также активность ММП-1. 2 и ММП-9 в дозе 167 мг/кг массы тела и 333 мг/кг массы тела. Основываясь на эффективных дозах у безволосых мышей, облученных УФ-В, доза для человека была рассчитана с использованием метода нормализации площади поверхности тела: 167 мг/кг массы тела мышей были переведены в 13,5 мг/кг массы тела человека; от 333 мг/кг массы тела мышей до 27,0 мг/кг массы тела человека. Таким образом, 1000 мг/день для человека были выбраны в качестве дозы для исследования на человеке из переведенных значений, примененных к среднему взрослому человеку с массой тела 60 кг: от 810 мг/день до 1620 мг/день.
2.2. Дизайн исследования
Это клиническое исследование имело рандомизированный двойной слепой плацебо-контролируемый дизайн. Оно проводилось в соответствии с применимой Надлежащей клинической практикой и Стандартными операционными процедурами компании Ellead Skin and Bio Research (Эллеад, Соннам, Кёнгидо, Корея) с 27 февраля 2012 г. по 15 июня 2012 г. Протокол исследования был рассмотрен и одобрен институциональный наблюдательный совет Ellead (номер проекта: EL-120208047A003).
2.3. Участники исследования
В исследование были включены женщины в возрасте 40–60 лет (n = 70), которые вызвались добровольцами и соответствовали указанным критериям включения и исключения (Таблица 2). Критерии включения включали оценку «гусиных лапок» от 2 до 6, как это определено дерматологами в соответствии с глобальной системой оценки фотоповреждений. Прежде чем приступить к клиническому исследованию, участники были четко и точно проинформированы о цели и протоколе исследования, а также о предсказуемых рисках, связанных с испытанием. Участники подписали форму информированного согласия. Шесть человек отозвали согласие, а остальные 64 начали исследование. Одиннадцать участников выбыли из исследования по личным причинам, а 53 завершили исследование.
Схема исследования. Сокращения: LMWCP, низкомолекулярный коллагеновый пептид; Вт, недели.
Таблица 2. Критерии включения и исключения для набора участников.
| Критерии включения |
|
| Критерий исключения |
|
2.4. График обучения
Все участники принимали по одной бутылке (перорально) назначенного им исследуемого препарата один раз в день. Чтобы свести к минимуму любую слабость исследования, все участники должны были воздерживаться от приема любых подобных пищевых добавок, а также от использования любых процедур по уходу за кожей, таких как маски для лица или компрессы и массажи. Им также не разрешалось применять косметику для местного применения, за исключением той, что была предоставлена Ellead, в течение 2-недельного периода смывания перед началом исследования и в течение 12-недельного периода исследования для поддержания постоянного состояния кожи. Каждый участник посещал исследовательский центр для оценки в общей сложности четыре раза: перед приемом исследуемого состава в начале исследования (0 нед), через 6 недель (6 нед) и через 12 недель (12 нед) после приема исследуемого состава для оценки эффективности. измерений и через 2 дня после завершения приема через 12 недель (12 З + 2 Д) для оценки безопасности. Перед посещением испытательного центра участникам запретили пользоваться косметическими средствами в течение 12 часов. При каждом посещении участники брили область «гусиных лапок», умывали все лицо очищающими пенками и отдыхали в течение 30 минут при постоянной относительной влажности (40–60%) и температуре (22–24 °C) перед оценкой. При каждом посещении исследовали одну и ту же часть лица теми же методами, что и при обследовании, проведенном при 0 Вт. Перед посещением для оценки безопасности участникам запрещалось есть и пить в течение ≥8 часов.
2.5. Измерение увлажнения кожи
Увлажнение кожи щечной области обозначенной стороны лица измеряют с помощью Corneometer CM 825 (Courage and Khazaka, Кёльн, Германия).
2.6. Измерение складок кожи
Сморщивание кожи оценивали двумя методами: визуальной оценкой дерматологами и инструментальным анализом изображений кожных реплик. Для визуальной оценки кожные исследования в области «гусиных лапок» проводились двумя дерматологами двойным слепым методом на основе глобальной системы оценки фотоповреждений. Была использована средняя оценка от двух дерматологов. Для инструментального анализа изображений реплик кожи реплики, сделанные с раствором на основе силикона и катализатором (Courage и Khazaka), были взяты из обозначенной области «гусиных лапок» и проанализированы с помощью Visiometer (SkinVisiometer SV 600, Courage and Khazaka), который оценивает топография поверхности кожи светопропусканием очень тонкой силиконовой реплики на основе параметров морщинистости кожи: R1 (шероховатость кожи), R2 (максимальная шероховатость), R3 (средняя шероховатость), R4 (глубина гладкости), R5 (арифметическая средняя шероховатость).
2.7. Измерение эластичности кожи
Кутометр MPA 580 (Courage and Khazaka) использовали для оценки эластичности кожи обозначенной зоны «гусиных лапок» на основе отсасывания кожи с помощью зонда с отрицательным давлением 450 мбар, при котором исследуемая зона втягивается в отверстие зонд. Измерение повторяли три раза с 2-секундным временем всасывания и 2-секундным временем релаксации для каждого измерения. Полученные кривые деформации кожи были проанализированы с помощью программы WinCutometer MPA для получения значений параметров эластичности кожи: R2 (общая эластичность кожи), R5 (чистая эластичность) и R7 (отношение упругого восстановления к общей деформации).
2.8. Выбор области тестирования
Чтобы удерживать тестовую зону для инструментальных измерений в фиксированном положении, после базовых измерений к лицу прикрепляли лицевую маску из ацетатной пленки. Область «гусиных лапок» и область щек, выбранные в качестве тестовой области, были отмечены ручкой на ацетатной пленке.
2.9. Анкета участника
Через 6 недель и 12 недель участники заполнили анкеты, касающиеся их субъективных оценок эффективности назначенных им составов и их пригодности в качестве здоровой пищи, безопасности (побочные реакции) и предпочтения продукта.
2.10. Анализ безопасности
Лабораторные тесты, проведенные при 0 W и 12 W + 2 D, представляли собой гематологические анализы крови, химические анализы, анализы мочи и измерения основных показателей жизнедеятельности. Объектами биохимического анализа крови были общий белок, альбумин, аспартатаминотрансфераза, аланинтрансаминаза, γ-GTP, азот мочевины крови, креатинин, глюкоза, общий холестерин, гемоглобин, гематокрит, количество лейкоцитов, количество эритроцитов, количество тромбоцитов, среднее значение. размер эритроцита (MCV), гемоглобин на эритроцит (MCH) и концентрацию гемоглобина на эритроцит (MCHC). Параметрами оценки мочи были pH мочи, удельный вес, белок, глюкоза, кетон, уробилиноген, билирубин и нитрит. Измеряемыми жизненно важными показателями были систолическое и диастолическое кровяное давление и масса тела.
Безопасность исследуемого материала также оценивалась путем наблюдения за побочными реакциями во время исследования посредством информации, собранной в ходе интервью и анкетирования.
2.11. Статистический анализ
Статистический анализ проводился двумя способами: посредством анализа намерения лечить (ITT) и анализа по протоколу (PP) с уровнем значимости 0,05, если не указано иное. Отсутствующие данные были обработаны методом переноса данных последнего наблюдения для анализа ITT. PP-анализ использовали для оценки эффективности, а ITT-анализ – для оценки безопасности. Все результаты теста эффективности, анализа крови, анализа мочи и теста основных показателей жизнедеятельности анализировали с использованием описательной статистики и сравнивали до и после лечения с помощью парных t -тестов и между группами с помощью независимых t -тестов. В анализе мочи для параметров, кроме удельного веса и рН, тесты Макнемара и U Манна-Уитни.тесты использовались после того, как результаты были классифицированы как нормальные или ненормальные. Частоту побочных реакций в каждой группе сравнивали с помощью критерия хи-квадрат или точного критерия Фишера.
3. Результаты
3.1. Базовые характеристики участников
Участники (n = 64) были рандомизированы на исходном уровне и распределены в тестовую группу (n = 33) или группу плацебо (n = 31). Значения возраста, массы тела, систолического и диастолического артериального давления и зрительной степени по типу «гусиных лапок» (общая оценка фотоповреждения) не показали каких-либо существенных различий между испытуемой группой и группой плацебо на исходном уровне.
Таблица 3. Исходные характеристики участников.
| Переменная | Тестовая группа (n = 33) | Группа плацебо (n = 31) | р -значение † | ||
|---|---|---|---|---|---|
| Среднее (стандартное отклонение) | Мин Макс | Среднее (стандартное отклонение) | Мин Макс | ||
| Возраст (лет) | 48,00 (4,50) | 40, 59 | 48,35 (4,32) | 43, 57 | 0,749 |
| Вес (кг) | 54,45 (5,25) | 44,3, 70,5 | 56,73 (4,46) | 48,1, 65,3 | 0,067 |
| Систолическое АД ( мм рт. ст.) | 117,61 (13,87) | 98, 140 | 114,52 (11,41) | 95, 140 | 0,336 |
| Диастолическое АД ( мм рт. ст.) | 71,79 (10,29) | 48, 95 | 69,35 (9,32) | 46, 91 | 0,326 |
| Визуальная оценка «гусиных лапок» | 3,21 (0,89) | 2, 6 | 3,19 (0,98) | 2, 5 | 0,937 |
Артериальное давление. † p -значения для сравнения t -критерия между значениями в тестовой группе и группе плацебо. Для достоверной разницы по t -критерию p < 0,05.
3.2. Влияние LMWCP на увлажнение кожи
Увлажнение кожи в испытуемой группе было значительно выше через 6 недель (p = 0,000) и 12 недель (p = 0,000), чем на исходном уровне, тогда как в группе плацебо не было различий по сравнению с исходным уровнем через 6 недель (p = 0,273), но гидратация значительно увеличилась через 12 недель (p = 0,001). При сравнении между группами значения гидратации кожи были значительно выше в тестовой группе, чем в группе плацебо через 6 недель и 12 недель (p = 0,000 и p = 0,003 соответственно). Прирост гидратации кожи в испытуемой группе был в 7,23 раза больше, чем в группе плацебо через 6 недель, и в 2,9 раза больше через 12 недель.
Изменения гидратации кожи у лиц, получающих препарат низкомолекулярного коллагенового пептида (LMWCP) или плацебо. Увлажнение кожи измеряли с помощью Corneometer CM825, и показаны изменения по сравнению с исходными значениями в произвольных единицах (AU). Данные выражены как среднее ± SEM. *** указывает на достоверное отличие от исходного уровня (p < 0,001; t -критерий). †† и ††† указывают на значительные различия между испытуемой группой и группой плацебо (p < 0,01 и p < 0,001 соответственно; t -критерий).
Таблица 4. Измерение показателей гидратации кожи с помощью Corneometer CM825.
| Момент времени | Тестовая группа | Группа плацебо |
Тест/плацебо р -значение † |
|||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Среднее (стандартное отклонение) | р -значение * | Среднее (стандартное отклонение) | р -значение * | |||
| Влага | 0 Вт | 47,79 (12,48) | 48,43 (12,52) | |||
| 6 Вт | 60,00 (9,91) | 0,000 *** | 50,12 (11,33) | 0,273 | 0,000 ††† | |
| 12 Вт | 61,14 (11,31) | 0,000 *** | 53,02 (13,59) | 0,001*** | 0,003 †† | |
* p -значения для сравнения t -критерия с исходными значениями;
*** указывает р < 0,001. † p -значения для сравнения t -критерия между значениями в тестовой группе и группе плацебо;
†† указывает на p <0,01, ††† указывает на p <0,001.
3.3. Влияние LMWCP на образование морщин на коже
В тестовой группе визуальная оценка, связанная с образованием морщин, значительно улучшилась по сравнению с исходным значением через 12 недель (p = 0,000) (Рисунок 3А,Таблица 5). Тестовая группа также продемонстрировала значительно отличающуюся визуальную оценку по сравнению с группой плацебо через 12 недель (p = 0,013) (Рисунок 3А,Таблица 5). Прирост улучшения визуальной оценки морщин в испытуемой группе был в 10,5 раз больше, чем в группе плацебо через 12 недель.
Изменения параметров морщин кожи у лиц, получающих препарат низкомолекулярного коллагенового пептида (LMWCP) или плацебо. (A) Изменения визуально оцениваемых баллов по шкале «гусиных лапок». (B) Изменения параметра морщинистости кожи R1 (шероховатость кожи). (C) Изменения параметра морщинистости кожи R3 (средняя шероховатость). (D) Изменения параметра морщинистости кожи R4 (глубина гладкости). R1, R3 и R4 измеряли инструментально с помощью кожного визиометра SV600. Изменения значений параметров по сравнению с исходным уровнем показаны в условных единицах (AU). Данные выражены как среднее ± SEM. * p -значения для сравнения t -критерия с исходными значениями; * указывает р < 0,05, ** указываетp < 0,01, *** означает p < 0,001. † p -значения для сравнения t -критерия между значениями в тестовой группе и группе плацебо; † указывает p <0,05, †† указывает p <0,01.
Таблица 5. Визуальная оценка гусиных лапок дерматологами.
| Параметр оценки | Момент времени | Тестовая группа | Группа плацебо |
Тест/плацебо р -значение † |
||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Среднее (стандартное отклонение) | р -значение * | Среднее (стандартное отклонение) | р -значение * | |||
|
Гусиные лапки Визуальная оценка |
0 Вт | 3,23 (0,95) | 3,19 (1,00) | |||
| 6 Вт | 3,19 (1,02) | 0,574 | 3,15 (1,03) | 0,574 | 0,988 | |
| 12 Вт | 2,81 (0,85) | 0,000 *** | 3,15 (1,03) | 0,746 | 0,013 † | |
* p -значения для сравнения t- критерия с исходными значениями;
*** указывает р <0,001. † p -значения для сравнения t- критерия между значениями в тестовой группе и группе плацебо; † указывает р <0,05.
Инструментально измеренные параметры морщин R1, R3 и R4 значительно улучшились в тестовой группе по сравнению с группой плацебо через 12 недель (p = 0,043, p = 0,025 и p = 0,004 соответственно). В тестовой группе R1, R3, R4 и R5 (данные не показаны) значительно улучшились по сравнению с исходным уровнем через 12 недель (p = 0,004, p = 0,001, p = 0,008 и p = 0,035 соответственно), тогда как ни один из эти параметры значительно улучшились в группе плацебо. В тестовой группе R3 также значительно улучшился через 6 недель по сравнению с исходным уровнем (p = 0,044).
Таблица 6. Параметры морщин на коже, измеренные с помощью Skin Visiometer SV600.
| Параметр оценки | Момент времени | Тестовая группа | Группа плацебо |
Тест/плацебо р -значение † |
||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Среднее (стандартное отклонение) | р -значение * | Среднее (стандартное отклонение) | р -значение * | |||
| R1 | 0 Вт | 0,42 (0,09) | 0,43 (0,08) | |||
| 6 Вт | 0,42 (0,08) | 0,854 | 0,42 (0,07) | 0,301 | 0,475 | |
| 12 Вт | 0,40 (0,07) | 0,004 ** | 0,43 (0,09) | 0,685 | 0,043 † | |
| R2 | 0 Вт | 0,28 (0,04) | 0,28 (0,04) | |||
| 6 Вт | 0,27 (0,04) | 0,066 | 0,28 (0,04) | 0,104 | 0,802 | |
| 12 Вт | 0,27 (0,04) | 0,055 | 0,28 (0,04) | 0,485 | 0,391 | |
| R3 | 0 Вт | 0,19 (0,03) | 0,19 (0,02) | |||
| 6 Вт | 0,19 (0,03) | 0,044 * | 0,19 (0,03) | 0,349 | 0,384 | |
| 12 Вт | 0,18 (0,02) | 0,001*** | 0,20 (0,03) | 0,866 | 0,025 † | |
| R4 | 0 Вт | 0,07 (0,02) | 0,07 (0,02) | |||
| 6 Вт | 0,07 (0,02) | 1.000 | 0,07 (0,02) | 0,894 | 0,926 | |
| 12 Вт | 0,06 (0,02) | 0,008 ** | 0,07 (0,02) | 0,130 | 0,004 †† | |
| R5 | 0 Вт | 0,18 (0,05) | 0,18 (0,05) | |||
| 6 Вт | 0,18 (0,05) | 0,519 | 0,18 (0,04) | 1.000 | 0,690 | |
| 12 Вт | 0,17 (0,04) | 0,035 * | 0,19 (0,05) | 0,388 | 0,053 | |
Параметры сморщивания кожи:
- R1 — шероховатость кожи;
- R2, максимальная шероховатость;
- R3 — средняя шероховатость;
- R4 — глубина гладкости;
- R5 — среднеарифметическая шероховатость.
* p -значения для сравнения t- критерия с исходными значениями;
* указывает на p < 0,05,
** указывает на p < 0,01,
*** указывает на p < 0,001. † p -значения для сравнения t- критерия между значениями в тестовой группе и группе плацебо; † указывает p <0,05, †† указывает p <0,01.
3.4. Влияние LMWCP на эластичность кожи
Значения параметров кожной эластичности общей эластичности кожи (R2) и чистой эластичности кожи (R5) были значительно выше в испытуемой группе, чем в группе плацебо через 12 недель (p = 0,025 и p = 0,027 , соответственно). В тестовой группе, однако, по сравнению с исходным уровнем только значение R5 было значительно улучшено через 12 недель (р = 0,002). В группе плацебо не было продемонстрировано значительного улучшения ни одного из параметров эластичности кожи по сравнению с исходными значениями в течение периода тестирования.
Изменения параметров эластичности кожи у лиц, получавших препарат низкомолекулярного коллагенового пептида (LMWCP) или плацебо. Эластичность кожи измеряли с помощью Cutometer MPA580. (A) Изменения параметра эластичности кожи R2 (общая эластичность). (B) Изменения параметра эластичности кожи R5 (чистая эластичность). Изменения значений параметров по сравнению с исходным уровнем показаны в условных единицах (AU). Данные выражены как среднее ± SEM. Для сравнения t -критерия с исходными значениями ** означает p <0,01. Для сравнения t -критерия между тестовой группой и группой плацебо † указывает p <0,05.
Таблица 7. Эластичность кожи, измеренная с помощью Cutometer MPA580.
| Параметр оценки | Момент времени | Тестовая группа | Группа плацебо |
Тест/плацебо р -значение † |
||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Среднее (стандартное отклонение) | р -значение * | Среднее (стандартное отклонение) | р -значение * | |||
| R2 | 0 Вт | 0,74 (0,07) | 0,75 (0,07) | |||
| 6 Вт | 0,75 (0,08) | 0,287 | 0,74 (0,06) | 0,638 | 0,261 | |
| 12 Вт | 0,76 (0,06) | 0,088 | 0,73 (0,09) | 0,156 | 0,025 † | |
| R5 | 0 Вт | 0,64 (0,14) | 0,63 (0,13) | |||
| 6 Вт | 0,65 (0,15) | 0,293 | 0,62 (0,13) | 0,517 | 0,262 | |
| 12 Вт | 0,71 (0,16) | 0,002 ** | 0,64 (0,15) | 0,328 | 0,027 † | |
| R7 | 0 Вт | 0,36 (0,05) | 0,36 (0,05) | |||
| 6 Вт | 0,37 (0,05) | 0,722 | 0,35 (0,04) | 0,409 | 0,368 | |
| 12 Вт | 0,38 (0,04) | 0,149 | 0,35 (0,06) | 0,452 | 0,139 | |
Параметры эластичности кожи: R2 — общая эластичность; R5, чистая эластичность; R7 — отношение упругого восстановления к полной деформации. * p -значения для сравнения t- критерия с исходными значениями; ** указывает р < 0,01. † p -значения для сравнения t -критерия между значениями в тестовой группе и группе плацебо; † указывает р <0,05.
3.5. Анализ лабораторных показателей и побочных реакций
Результаты биохимических анализов крови, анализов мочи и показателей жизнедеятельности показали, что все измеренные параметры испытуемой группы и группы плацебо находились в нормальных пределах до и после приема. Статистический анализ всех данных не показал существенных отличий от нормы. В ходе исследования ни у одного из участников не наблюдалось побочных реакций.
4. Дискуссия
Растет использование коллагена или гидролизатов коллагена в качестве пищевых продуктов или пищевых добавок для улучшения свойств кожи. LMWCP представляет собой гидролизат коллагена типа I рыбного происхождения, который получают путем ферментативного гидролиза и содержит >15% трипептидов (Gly-XY, где X и Y представляют собой различные аминокислотные остатки, часто представляющие собой пролин, гидроксипролин или аланин), в том числе 3% Gly-Pro-Hyp. Результаты предыдущего исследования на животных показали, что пероральный прием LMWCP может улучшить функцию кожи человека. В этом клиническом испытании мы исследовали эффективность перорального приема LMWCP на функцию кожи человека. Результаты показали, что пероральный прием 1 г LMWCP один раз в день в течение 12 недель значительно улучшал увлажнение кожи, уменьшал морщины и повышал ее эластичность у людей.
При пероральном приеме гидролизатов коллагена небольшие пептиды, полученные из коллагена (такие как трипептид Gly-Pro-Hyp), могут быть обнаружены в крови человека с пиковыми концентрациями, наблюдаемыми через 1-2 часа после приема . Gly-Pro-Hyp легко всасывается через кишечник в кровь у крыс и людей. У крыс и мышей поглощенный Gly-Pro-Hyp остается в плазме в течение нескольких часов с максимальной концентрацией ~2-4 часа после введения и может быть обнаружен в различных тканях, особенно в коже, где он остается дольше, чем в других тканях. У людей дипептид Pro-Hyp (который не переваривается пептидазой) был обнаружен в крови вместе с Gly-Pro-Hyp, что позволяет предположить, что Pro-Hyp происходит от Gly-Pro-Hyp . Перенос биологически функционального Pro-Hyp в кожу может стимулировать миграцию и рост фибробластов, тем самым оказывая благоприятное влияние на функцию кожи, поскольку дермальные фибробласты обеспечивают синтез коллагена, эластических волокон и дермальной гиалуроновой кислоты. Наше наблюдение положительного воздействия на кожу в результате перорального приема LMWCP свидетельствует о том, что трипептиды, содержащиеся в LMWCP, эффективно всасываются и являются биологически активными.
В этом исследовании как в тестовой группе, так и в группе плацебо продемонстрировано значительное улучшение увлажнения кожи по сравнению с исходным значением через 12 недель. Однако только в тестовой группе наблюдалось значительное улучшение ранее, через 6 недель, тогда как в группе плацебо значительного улучшения не наблюдалось. И через 6 недель, и через 12 недель показатели гидратации кожи были значительно выше в тестовой группе по сравнению с группой плацебо. Улучшение исходных значений в группе плацебо через 12 недель могло быть связано с эффектом материала-носителя и/или косметических средств, предоставленных исследователями. Однако было доказано, что эффективность увлажнения кожи только LMWCP является статистически значимой после обнуления эффективности материала-носителя и/или используемых косметических средств. На увлажнение кожи влияет вода, связанная с ГК в дерме и эпидермисе. Было показано, что полученный из коллагена Hyp-содержащий пептид Pro-Hyp стимулирует синтез HA путем активации транскрипции HAS2 в дермальных фибробластах человека. Можно предположить, что улучшение гидратации кожи, которое произошло в настоящем исследовании, могло быть результатом увеличения выработки ГК с помощью Pro-Hyp, полученного из LMWCP. Однако это необходимо доказать дальнейшими исследованиями в будущем.
Улучшения морщин кожи, которые мы наблюдали в этом исследовании в ответ на прием LMWCP, хорошо совпадают с результатами предыдущего исследования на животных, где экспрессия и активация MMPs (MMP-1 (MMP-13 у грызунов), MMP-2, MMP -3 и MMP-9) подавляются пероральным введением LMWCP мышам, облученным UVB, тем самым увеличивая содержание коллагена в коже и уменьшая образование морщин.
Механические свойства кожи человека: эластичность, упругость и прочность в основном зависят от сетей коллагена и эластических волокон в ECM в дерме, и известно, что сеть эластических волокон вносит наибольший вклад в эластичность кожи. MMP-2 и MMP-9 расщепляют нерастворимый эластин до растворимых фрагментов, а MMP-2, MMP-9 и MMP-13 катаболизируют фибриллиновые микрофибриллы, поэтому, вероятно, снижается регуляция этих белков. влиять на уровень эластических волокон в коже. Следовательно, пероральный прием LMWCP мог благоприятно повлиять на содержание как коллагеновых, так и эластических волокон в коже за счет подавления MMP, тем самым улучшая морщинистость кожи и эластичность кожи. Параметр эластичности кожи R5 (чистая эластичность) представляет собой только эластичные характеристики кожи, поэтому на него могут влиять исключительно эластичные волокна. В этом исследовании R5 в испытуемой группе значительно улучшился по сравнению с исходным уровнем через 12 недель, в то время как R2 (общая эластичность) и R5 были достоверно выше по сравнению с группой плацебо, что позволяет предположить, что LMWCP непосредственно оказывает влияние на эластичность кожи фотостарение кожи, потому что одним из критериев включения для набора участников было указание подходящей оценки фотоповреждения участка, подверженного воздействию УФ-излучения, гусиных лапок. Гидратация кожи также сильно влияет на эластичность кожи, поскольку конформационные изменения эластина происходят только в гидратированном белке. Таким образом, повышенный уровень гидратации кожи, который мы наблюдали после приема LMWCP, мог способствовать повышению эластичности кожи. Побочных реакций на LMWCP не наблюдалось, а результаты лабораторных анализов и анализов показателей жизнедеятельности в группе LMWCP были в пределах нормы.
Наши результаты показали, что пероральный прием LMWCP (1000 мг один раз в день в течение 12 недель) эффективно улучшал состояние фотостареющей кожи в когорте женщин в возрасте 40–60 лет, значительно улучшая гидратацию кожи уже после 6 недель приема и морщинистость и эластичность кожи после 12 недель приема. Препарат LMWCP хорошо переносился участниками исследования. Хотя это исследование было проведено только для лиц женского пола в возрасте от 40 до 60 лет, результаты могут быть справедливы для мужчин и других возрастных групп. Тем не менее, рекомендуется провести дальнейшие исследования с участием мужчин и женщин в разных возрастных группах, чтобы обобщить эффективность LMWCP против фотостарения. Кроме того, было бы также желательно, чтобы использовалось большее количество участников, поэтому в будущих исследованиях можно ожидать более надежных результатов.
5. Выводы
LMWCP является безопасным для здоровья функциональным пищевым ингредиентом с эффективностью против фотостарения кожи, который может эффективно улучшать увлажнение, эластичность и морщины кожи человека в дозе 1000 мг один раз в день.
